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Gibco 新一代基础培养基在提高CHO细胞表达方面的应用

Gibco ExpiCHO stable production medium (以下简称ExpiCHO SPM) 稳定生产型培养基沿用Gibco AGT 专利技术,它是一种无蛋白质、无水解物、无生长因子、无任何动物来源成分的一款化学成分限定的培养基, ExpiCHO SPM支持从瞬转到稳转的简单过渡,提供细胞高表达量而不需要额外的培养基优化,既可以作为单克隆培养基,提高单克隆的形成率,也适应于所有CHO细胞的大规模批量培养。


目前ExpiCHO SPM培养基已成功应用于生物制药领域中CHO细胞的大规模批量培养,ExpiCHO SPM适用于不同的CHO细胞类型,如Horizon HD-BioP3CHO-K1 Lonzas CHOK1SV GS-KO, CHO-S等细胞系。
Case #1ExpiCHO SPMHorizon HD-BioP3某克隆细胞系上的应用
细胞系:Horizon HD-BioP3;
培养基:Gibco ExpiCHO SPM Gibco Dynamis Medium A Feed A (来自供应商C)
培养方式:Batch & Fed-batch
实验结果分析:


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Fig 1, Horizon HD-BioP3细胞在batch实验中的生长曲线


由图1可以得知,在Batch实验中,Horizon HD-BioP3细胞在ExpiCHO SPMDynamis两种培养基中的细胞密度最高分别可达13.2*106 cells/ml13.8*106cells/ml,细胞活率在第6天时均大于98%

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 Fig 2, Horizon HD-BioP3细胞在fed-batch实验中的生长曲线


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Fig 3,不同培养基条件下D14的titer值


由图2可以得知,细胞在Dynamis + Feed AExpiCHO SPM + Feed A培养基中组合培养基中的细胞生长都很好,细胞密度最高分别可达38.6*106cells/mL37.9*106cells/mL,而在Medium A+ feed A的细胞生长略逊于Dynamis + Feed AExpiCHO SPM + Feed A;从细胞表达产量看(Fig 3),细胞在ExpiCHO SPM+ Feed AD14titer最高,其值为4191mg/L,Dynamis+ Feed A组的titer高了27%,比Medium A + Feed A titer高了76.3%;这说明ExpiCHO SPM在提升蛋白表达方面有着明显的优势。


Case# 2, ExpiCHOSPM CHO-K1细胞系上的应用
细胞:CHO-K1 来源ATCC
培养方式:Fed-batch
培养基:ExpiCHO SPM Medium AFeed A(来自供应商C,
补糖策略:低于4g/L时补至6g/L
实验结果分析:


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Fig 4, 细胞生长曲线


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Fig 5, 细胞蛋白表达Titer


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Fig 6,细胞培养过程中代谢参数


由图4-6可以得知,CHO-K1细胞株在Expi CHO中的细胞生长,蛋白产量和代谢参数与Medium A相比都更优异,其中,与Medium A相比,提前两天达到最高细胞密度,最高细胞密度为18.8*106,较Medium A36%D14titer7.046g/L,比在Medium A中的提高了约10% 此外,细胞在ExpiCHO SPM培养基中的乳酸代谢含量可以控制在很低的水平(小于0.2g/L,可以使细胞处于一个比较良好的生长环境中。


Case#3ExpiCHO SPM在某 CHO-S细胞系表达融合蛋白的应用
细胞株:ExpiCHO-S
培养方式:Batch
培养基:ExpiCHO SPM ExpiCHO expression medium CD CHO medium Medium A/B/C/D/E/F(来自不同的供应商)


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Fig 7, 细胞在不同培养基中的细胞密度和活率


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Fig 8,细胞在不同培养基中的蛋白表达



由图7和图8可知,在Batch实验中,相较其它培养基而言,该细胞在ExpiCHO SPM中的细胞表现最好,titer可达1.348g/L

通过以上3个案例说明,ExpiCHO SPM 培养基在细胞生长和细胞蛋白表达方面都有着优异的表现。此外,它在用于培养Lonza  CHOK1SV GS-KO细胞系时,还可以缩短细胞的倍增时间,提升抗体产物的质量(如可降低双抗分子的错配率等)。总之,ExpiCHO SPM是一款适用于CHO细胞大规模培养的高表达的性能优良的培养基,可以有效地赋能CHO细胞生产高表达高质量的蛋白产物。



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